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小鼠臭氧暴露对照实验方案
一、实验目的
研究不同浓度臭氧（O₃）暴露对小鼠的生理影响，设置低、中、高三个臭氧暴露组及对照组，观察臭氧暴露的生物学效应。
二、实验设备清单
1. 臭氧发生与暴露系统
- 臭氧发生器（可精确调控浓度，UV-M2臭氧发生器）
- 动态暴露舱（分区设计，独立控制）
- 臭氧浓度监测仪（实时检测并记录浓度3S-J5000）
- 空气过滤系统（用于对照组清洁空气供应）
2. 环境控制设备
- 温湿度监控仪（维持稳定实验环境）
- 气流调节装置（确保均匀暴露）
- CO₂/O₂监测仪（保障动物福利）
3. 动物饲养与管理设备
- 独立通风笼具（IVC系统，SPF级）
- 生物安全柜（用于动物操作）
- 电子天平（称量动物体重）
4. 样本采集与分析设备
- 解剖器械（手术剪、镊子等）
- 离心机（用于血液/组织样本处理）
- 酶标仪（ELISA检测炎症因子）
- 病理切片机（组织学分析）
- 生化分析仪（检测氧化应激指标）
三、实验方法
1. 实验动物与分组
- 使用指定小鼠
- 随机分为4组（n=10/组）：
- 对照组：过滤清洁空气，Nh/天
- 低浓度组：100 μg/m³ O₃，Nh/天
- 中浓度组：200 μg/m³ O₃，Nh/天
- 高浓度组：400 μg/m³ O₃，Nh/天
2. 臭氧暴露流程
1. 系统校准：
- 使用臭氧检测仪校准各暴露舱浓度
- 调整臭氧发生器输出至目标浓度（100/200/400 μg/m³）
2. 每日暴露程序：
- 将小鼠转移至暴露舱，连接监测系统
- 持续通入设定浓度的臭氧/清洁空气（12小时）
- 暴露结束后返回标准饲养环境
3. 环境监测：
- 每2小时记录臭氧浓度、温湿度
- 确保对照组空气无臭氧污染
3. 样本采集与处理
- 体重监测：每周称量记录
- 血液采集：尾静脉取血或心脏穿刺
- 组织取样：
4. 检测指标
- 氧化应激指标：SOD、MDA、GSH-Px
- 炎症因子：IL-6、TNF-α（ELISA法）
- 病理分析：肺组织HE染色
四、注意事项
1. 严格校准臭氧浓度，避免组间交叉污染
2. 对照组空气需经过高效过滤（HEPA）
3. 实验期间保持光照周期一致（如12h光照/12h黑暗）
4. 所有操作符合动物伦理规范
本方案可根据具体研究需求调整检测指标和暴露时长。建议预实验确定暴露周期。
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