EPR是一种非破坏性分析技术，是可用于直接检测顺磁性物质的方法。自由基和过渡金属离子可以在固体，液体，气体，细胞和体内进行鉴定和定量。从化学结构到分子间相互作用的结构见解来自CW和脉冲 EPR技术（ESEEM，ENDOR，DEER，Relaxation和Simulation）。

 

EPR的众多应用

从细胞膜到纳米金刚石，EPR应用在很多领域广泛传播：  化学，  材料研究，  生命科学，  量子物理学和  质量控制。

 

在电化学，氧化还原化学，光化学和催化中，EPR可用于研究化学过程中涉及的金属中心和自由基。在材料科学的众多领域中，应用包括聚合物合成，测试太阳能电池中硅的纯度以及纳米金刚石和钻石分级的表征。在工业环境中，EPR用于监控产品稳定性，杂质分布，降解，风味稳定性和保质期，以实现质量和过程控制。

 

在结构生物学中，EPR提供了对酶，膜蛋白，RNA和DNA的结构，功能和反应机制的深入了解。生物医学EPR应用包括检测ROS和RNS等自由基，以观察和评估氧化应激和细胞损伤。

 

什么是 EPR？

EPR（电子顺磁共振）是一种可检测含有未成对电子的物质的波谱学技术。该技术又称为 ESR（电子自旋共振）技术。含有未成对电子的材料多得惊人。这些材料内部存在自由基、多种过渡金属离子，或者缺陷。自由电子的寿命通常很短，但它们在许多过程中仍然发挥着至关重要的作用，比如光合作用、氧化作用、催化作用、聚合反应等等。因此，EPR 是一种跨越多个学科的技术，包括化学、物理学、生物学、材料科学、医学等。

 

EPR 可以提供哪些信息？

目前，只有 EPR 技术可以明确检测未成对电子。荧光检测等其它技术只能提供有关自由基的间接证据，只有 EPR 才能确切地证明自由基的存在。此外，EPR 还拥有检出并鉴定顺磁物质的独特能力。EPR 样品对局部环境非常敏感。因此，该技术可提供有关未成对电子附近的分子结构的信息。EPR 谱有时还会呈现剧烈的谱线形状变化，这有利于分析人员深入研究分子运动或流动性等动态过程。EPR 自旋捕获技术可检测短寿命的活泼自由基，是利用 EPR 技术检测和鉴定自由基的一个范例。该技术在生物医学领域一直以来都至关重要，被广泛用于研究自由基的病理学和毒理学作用。EPR 自旋标记是生物化学家常用的一项技术，它使用顺磁分子（即自旋标记）来“标记”特定区域的大分子。根据自旋标记物的 EPR 谱，生物化学家可确定自旋标记处于怎样的环境下（疏水性、酸碱度、流动性等）。

 

ESEEM 和 ENDOR 是两种 EPR 方法，可测定电子与附近核之间的相互作用。它们都是用于探查金属蛋白中“活性位点”结构的强大技术。定量 EPR 的另一项非常重要的应用是辐射剂量测定法。其用途包括医疗用品和食品的灭菌剂量测定、辐照食品的分析检测，以及早期人类器物的年代测定等等。

 

EPR 的工作原理是什么？

EPR 是一种磁共振技术，与 NMR（核磁共振）非常相似。但是，该技术不测量样品中的核跃迁，而是检测未成对电子在外加磁场中的跃迁。电子和质子一样会有“自旋”，所以拥有“磁矩”这种磁属性。磁矩会使电子形成类似小磁条的排布，就像您贴在冰箱上冰箱贴那样。当我们施加外部磁场时，顺磁性电子会按照与磁场平行或反平行的方向排布。这会使未成对电子产生两种能量不同的能级，而当电子被分为两个能级时，我们便可以对其进行测量。

 

起初，处于低能量能级的（即与磁场平行的）电子更多，而高能量能级的（反平行）电子较少。我们使用固定频率的微波辐射来激发部分低能量能级的电子，使其跃迁到高能量能级。为了使跃迁发生，我们还必须让外部磁场保持特定的强度，使得低能级和高能级之间的能级间隔完全匹配我们的微波频率。为了创造上述条件，需要在样品暴露于固定频率微波辐射的同时，扫描外部磁场。如果磁场和微波频率“完全匹配”，则可产生 EPR 共振（或吸收），此条件称为共振条件，上图中的方程式对此进行了说明。下方是典型 EPR 波谱仪的图解。